Parazitologické vyšetření stolice
* - označuje metody prováděné vždy § - označuje metody prováděné jen při podezření na dané agens |
Standardní parazitologické vyšetření
Specializované vyšetření stolice po návratu z tropů a subtropů - určeno pro diagnostiku běžných i méně běžných importovaných parazitóz (Schistosoma spp., Trichostrongylus spp., Trichuris trichiura,…) Metody:
* flotační metoda dle Fausta |
Nativní preparát ze stolice
Princip:
- hledáme pohybující se trofozoity prvoků (např. Entamoeba histolytica), je nutné dodat do čerstvou stolici a dopravit ji při tělesné teplotě.
- v nativním preparátu můžeme nalézt i vajíčka helmintů a cysty prvoků.
Postup:
Princip:
- metoda je založena na vyšší specifické váze flotačního roztoku (hustota 1,180) než parazitárních útvarů.
Parazitární útvary ve zkumavce vyplavou na hladinu, kde je zachytíme.
- v preparátu najdeme určitým způsobem deformované cysty prvoků, menší larvy a menší vajíčka helmintů
- flotačním roztokem je 33% ZnSO4.
Trichrom dle Gomori
Princip: cysty a trofozoity prvoků nalezené při použití předchozích metod je nutné určit, k čemuž nám pomůže barvený preparát.
Postup:
Špejlí rozetřeme vzorek na podložní sklíčko
Sklíčko dáme fixovat do první kyvety (sublimát alkohol) na minimálně 1 hodinu, nátěr nesmí zaschnout (během celého barvení!) |
||
Dále barvíme dle obrázku. | ||
Nakonec preparát montujeme do kanadského balzámu. | ||
Prohlížíme pod mikroskopem při celkovém 1000x zvětšení imerzním objektivem (příklad - Entamoeba dispar). |
Sedimentační koncentrační metoda formol-étherová
Metoda je používána při vyšetřování vzorků stolic od osob přišedších z tropů a subtropů. Slouží k záchytu cyst prvoků a vajíček helmintů. Vhodná zejména pro větší vajíčka helmintů (např. vajíčka schistosom), která díky své velikosti nevystoupají k hladině ve zkumavce při flotační metodě dle Fausta.
Postup:
Asi 1g stolice se rozmíchá ve fyziologickém roztoku ve zkumavce a několikrát se centrifuguje a promývá. Vypraný sediment se rozsuspenduje v 4% formaldehydu a po přidání etheru se roztřepe a zcentrifuguje. Třívrstevný supernantant se odstraní a sediment se prohlíží pod mikroskopem. Sediment lze použít pro přípravu barvených preparátů. | ||
Prohlížíme pod mikroskopem. Příklad - vajíčko Schistosoma mansoni. |
Kultivace střevních protozoí (Dobell et Laidlaw)
Metoda je používána především k záchytu a kultivaci améb Entamoeba histolytica/dispar.
Šikmo nalité koňské sérum se nechá koagulovat při 80°C, skladuje se při 4°C. Před použitím se převrství Ringerovým roztokem, sérem a obohatí rýžovým škrobem. Po vytemperování na pokojovou teplotu se inokuluje stolice velikosti obilného zrna. Kultivuje se při 37°C. Sediment se mikroskopuje nativně po 24 a 72 hodinách. | ||
Prohlížíme pod mikroskopem. Příklad - Entamoeba dispar. |